河北医药

2021, v.43(03) 325-329+334

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miR-1224-5p靶向调控HMOX1基因对心肌细胞缺血再灌注损伤的影响
Effects of miR-1224-5p targetedly regulating HMOX1 gene on myocardial ischemia-reperfusion injury in vitro

代天;杨萍;刘波;张苏川;

摘要(Abstract):

目的探讨微小RNA-1224-5p(miR-1224-5p)靶向调控血红素加氧酶1(HMOX1)基因对大鼠心肌细胞H9C2缺血再灌注(I/R)损伤的影响。方法体外培养大鼠心肌细胞H9C2,模拟心肌I/R损伤。按照处理方法将大鼠心肌H9C2细胞分为对照组(Control组)、I/R组、I/R+anti-miR-con组、I/R+anti-miR-1224-5p组、I/R+anti-miR-1224-5p+si-con组、I/R+anti-miR-1224-5p+si-HMOX1组。qRT-PCR检测miR-1224-5p表达水平,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,Western Blot检测HMOX1蛋白表达水平。StarBase在线网站预测显示,HMOX1的3’-非翻译区(3’UTR)存在miR-1224-5p的结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证miR-1224-5p与HMOX1靶向关系。结果与Control组比较,I/R组miR-1224-5p、凋亡率、MDA、LDH和AST水平升高(P<0.05),H9C2细胞存活率和SOD水平降低(P<0.05)。与I/R+anti-miR-con组比较,I/R+anti-miR-1224-5p组miR-1224-5p、凋亡率、MDA、LDH和AST水平降低(P<0.05),H9C2细胞存活率和SOD水平升高(P<0.05)。miR-1224-5p在心肌细胞H9C2中抑制HMOX1的表达。与I/R+anti-miR-1224-5p+si-con组比较,I/R+anti-miR-1224-5p+si-HMOX1组H9C2细胞凋亡率、MDA、LDH和AST水平升高(P<0.05),H9C2细胞存活率、HMOX1蛋白和SOD水平降低(P<0.05)。结论过表达miR-1224-5p通过靶向负调控HMOX1表达保护心肌细胞缺血再灌注损伤。

关键词(KeyWords): 心肌细胞;缺血再灌注损伤;miR-1224-5p;血红素加氧酶1;保护作用

Abstract:

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基金项目(Foundation):

作者(Author): 代天;杨萍;刘波;张苏川;

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